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답변대기
제브라피쉬 larvae, adults 눈 조직 절편 제작 관련해서 질문드립니다.
Q
작성자
**
작성일
2024-11-20 16:06
조회
6회
안녕하세요. 제브라피쉬 larvae와 adults의 눈(망막 세포층)을 관찰하기 위해서 조직절편을 제작하고자 합니다.
저희가 사용할 수 있는 방법이 파라핀 블록 제작 후 약 5 um 두께의 절편을 만드는 것이고, 6 dpf의 larvae는 whole body를, adults (약 3 cm)는 eye를 dissection해서 사용하였습니다.
이번에 처음 시도해본 결과, 검체의 위치를 조정하는 것과 (눈에 대해 transverse로 자르기 위함) 적절한 위치까지 절편을 자르는 것 (retina의 cell layer가 다 나오기 위함)에 어려움을 겪고 있습니다.
혹시 관련해서 도움을 받을 수 있는 방법이 있을까싶어서 문의드립니다. 감사합니다.
(첨부한 파일은 저희가 원하는 결과를 포함한 파일입니다.)
A
답변 대기중.....
**
2024-11-20
6
답변완료
제브라피쉬 치어가 자꾸 10~11 dpf에 죽는데 사육 노하우 전수해주세요.
Q
작성자
이**
작성일
2024-07-23 19:42
조회
76회
현재 치어는 E3 배지에서 사육중이고 , 사료는 하루 1회 로티퍼를 공급중입니다.
인큐베이터에서 키우는 중이고, 9:00~22:00 명주기 입니다.
사육 초기에는 잘 살아남는데 왜 항상 10 dpf에 폐사하는 건가요?
A
안녕하세요 KZRC입니다.
문의하신 배아 사육 방법 및 조건에 대해서 답변드리겠습니다.
온도는 28도를 맞춰 주시고 핫플레이트 안에 물은 Egg Water를 만들어서 갈아주면서 키우면 됩니다.
3dpf에서부터는 상온에서 사육이 가능하고 Rotifer를 급여해 주고 15dpf에서부터 artemia를 급여하여 키우시면 됩니다.
아침 9시부터 저녁 10시까지 만 전등 불빛이 들어와야 사육환경에 도움이 됩니다.
Egg Water, Rotifer , artemia 정보는 Support에 Reagents & Equipments 혹은 Recipes에 나와있습니다.
추가로 Egg Water가 준비가 어려우면 시중에 나와있는 생수로 사육이 가능합니다.
생수 브랜드는 상관없이 모두 사용이 가능하고 정수기 물은 사육이 어렵습니다.
감사합니다.
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이**
2024-07-23
5
답변완료
Mutant/TG 배아를 이용한 실험과 관련해서 문의드립니다.
Q
작성자
유송은
작성일
2024-07-08 15:30
조회
66회
안녕하세요. Mutant/TG 배아 관련하여 여쭤보고 싶은 게 있어서 문의드립니다.
저는 현재 나노플라스틱에 노출된 제브라피쉬 자어에서 골격 형성 및 발달(기형이 나타나기도 하는지, 어떤 기형이 주로 나타나는지)과 관련한 실험을 진행하려고 하고 있습니다.
Signaling Reporter Lines의 BMP 자어를 이용해서 해당 정보를 확인하는 것이 가능할까요?(어떤 뼈가 표지되어 나타나는지, 사용한 자어를 가지고 qPCR을 진행해도 결과에 영향이 없는지 알고 싶습니다.)
읽어주셔서 감사합니다. 좋은 하루 되세요!
A
안녕하세요 KZRC 입니다.
문의에 관련하여 논문하나 보내드리도록 하겠습니다.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3072245/Dynamic Smad-Mediated BMP Signaling Revealed Through Transgenic Zebrafish
논문에서 보면 somite muscle cell, notochord, midbrain-hindbrain neurons 등 다양한 곳에 발현한다고 나와있습니다.
이는 larvae stage에서 확인한 것입니다.
혹시 실험에 관련되어 있으면 분양신청하시면 분양은 가능합니다.
댓글등록
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유송은
2024-07-08
4
답변완료
Zebrafish 사육 환경 관련 질문 드립니다.
Q
작성자
이**
작성일
2024-07-03 17:31
조회
67회
안녕하세요. 저희 실험실에서 키우고 있는 zebrafish가 breeding을 못하고 상태도 점점 안 좋아져 AB strain 새로 분양 받았었습니다.
그런데 새로 분양 받은 zebrafish도 breeding을 해보기 전에 모두 죽어버려 저희 사육 환경에 문제가 있다고 판단하여 어떻게 보완해야 할지 여쭤보고자 합니다.
저희 실험실에서는 지역 원수를 5um, Carbon, 1um filter를 거친 후 시스템에 있는 50um filter와 UV를 추가로 거쳐 순환시키고 있습니다.
온도는 28-30도, pH는 7.0-7.5, nitrate는 50mg/L 이상이 되지 않도록 유지하고 있습니다.
또한 불은 9시에 불을 키고 23시에 불을 끄고 있으며 먹이는 brine shrimp로 하루 2번씩 치어는 3번씩 주고 있습니다.
추가로 확인해야 할 사항이나 구비해야 할 장비에 대해 말씀해 주신다면 앞으로의 실험에 큰 도움이 될 듯 합니다. 감사합니다!
A
안녕하세요. KZRC 입니다.
문의 해주신 zebrafish 사육 환경은 저희가 선생님 실험실로 현장 방문하여 원인을 찾아 답변 드리도록 하겠습니다.
자세한 사항은 이메일로 알려드리겠습니다.
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이**
2024-07-03
3
답변완료
제브라피쉬 치어 먹이 문의 드립니다.
Q
작성자
김**
작성일
2024-06-17 17:47
조회
67회
저희 실험실에서는 zebrafish strain 확립 차 AB strain 분양 받았습니다.
지속적으로 mating 시키고 있는데 부화 후 10일이 지난 즈음 치어가 집단으로 죽는 현상이 계속해서 발생하고 있습니다.
자료를 찾아 보니 먹이를 먹지 못할 때 나타나는 현상이라 합니다.
저희 실험실에서는 현재까지 artemia, 탈각 분말 artemia 를 치어 먹이로 급여 해 보았습니다.
귀 실험실에서는 치어를 키울 때 어떤 먹이를 사용하고 있는지 궁금합니다.
A
안녕하세요. KZRC 입니다.
현재 저희 실험실에서는 다량의 치어를 사육하고 있기 때문에 로티퍼(rotifer)를 키워서 급여하고 있습니다.
이외에도 제브라피쉬를 사육하는 타 실험실의 경우 파우더 형태의 젬마(gemma)를 급여 하는 방식을 사용하고 있습니다.
위 같은 경우 파우더 형태를 바로 수조에 급여 하게 되면 금방 물이 탁해지므로 수질 관리에 있어서 다른 방식에 비해 더욱 신경을 써주어야 합니다. 급여 10분이 지난 후 수면 위의 잔여 사료를 스펀지로 걷어내는 방식으로 수질을 관리하여 치어를 사육하시는 것이 죽는 현상을 줄이는데 도움이 됩니다.
▶로티퍼 구매 사이트:
https://aquasm.com/html/index.html
▶젬마 구매 사이트:
http://21cht.com/search?keyword=gemma
저희 실험실에서 사용하는 물품들은 저희 홈페이지 support 탭에서 확인하실 수 있습니다.
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김**
2024-06-17
2
답변완료
사육시설 배수 시스템 문의드립니다.
Q
작성자
김은미
작성일
2024-06-17 11:42
조회
64회
안녕하세요.
제브라피쉬 사육실 배수시설이 어떻게 되어있는지 참고할 수 있는 사진(자료) 부탁드립니다.
감사합니다.
A
안녕하세요. KZRC 입니다. 문의하신 사항에 대해 답변드리겠습니다.
아래 첨부해드린 사진을 참고해주세요.
1. 전반적인 배수시설 사진입니다.
2. 트렌치 깊이는 총 6cm이고 배수로는 5cm 입니다.
3. 바닥에 배수펌프로도 운용이 가능합니다. (출처: 국립해양생물자원관 정승현 박사)
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김은미
2024-06-17
1
답변완료
[문의] 배아 꼬리지느러미 절단 기법 문의드립니다.
Q
작성자
동남환경**
작성일
2024-04-30 13:39
조회
102회
안녕하세요. (주)동남의화학연구원 박아현 과장입니다.
제브라피쉬 배아의 꼬리지느러미 절단 수술을 진행하는 과정에 어려움이 있어 문의드리고자 합니다.
핀셋을 이용하여 몸통 부분을 잡고, 정밀 가위를 이용하여 꼬리 지느러미를 절단 시 핀셋으로 잡은 몸통 부분이 바로 으스러지게 됩니다.
점성이 있는 용액에 고정하려해도, 몸통에 용액이 코팅되면서 시험물질을 처리하는 것에 어려움이 있습니다.
72hpf의 배아의 꼬리 지느러미를 절단할 수 있는 방법을 가르쳐주시면 감사하겠습니다.
확인 부탁드립니다. 감사합니다.
A
안녕하세요. KZRC 입니다.
문의하신 사항에 대해서 답변드리겠습니다.아래 첨부한 사진을 참고해주세요.
배아 꼬리지느러미 절단 기법
1. 1 ml팁 끝을 자른다.
2. 파이펫을 이용하여 3 dpf embryo 한마리를 petri dish에 옮긴다.
3. embryo주변 물기를 파이펫을 이용하여 제거한다.
4. 1 ml syringe의 바늘을 이용하여 현미경을보고 fin을 조금 자른다.
5. fin을 잘린 embryo주변에 egg water을 조금 넣고 다시 파이펫으로 petri dish에 옮겨준다.
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동남환경**
2024-04-30
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