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답변대기 Microinjection sgRNA Template 제작 과정 문의
Q
작성자 이** 작성일 2026-02-03 15:24 조회 5회
안녕하세요.
이번 교육 세미나를 토대로 연구실에서 sgRNA Template를 제작하려 하고 있습니다.
다만 교육 자료에 나와있는 혼합물 조성 중 Oligo A primer는 target sequence를 넣어 만들지만, Oligo B primer는 서열이 그대로 나와있어서 만약 제작하게 된다면 Oligo B primer는 자료에 나온 서열 그대로 만들어도 무방한지 여쭤보고 싶습니다.
답변등록
A
답변 대기중.....
 이** 5회 2026-02-03
42
답변대기 Purkinje cell specific Tg zebrafish line 문의
Q
작성자 ka** 작성일 2026-01-31 01:26 조회 9회
안녕하세요 차의과학대학교 정상용 교수님 연구실 이강한입니다.

ca8, aldoca, pvalb7 같은 Purkinjec cell specific Tg line을 찾고 있는데 현재 거점은행 list에는 없는 것 같아서

국내에 라인이 유지되고 있다면 분양을 받고 싶어 문의 드립니다.
답변등록
A
답변 대기중.....
 ka** 9회 2026-01-31
41
답변완료 치어 스피룰리나 급여 관련 문의드립니다. (4)
Q
작성자 KHU제브라** 작성일 2026-01-16 14:29 조회 53회
안녕하세요.

현재 제브라피쉬 치어 사육 시, 초기 먹이로 GroVita를 5 dpf부터 하루 1회 급여하고 있으나 치어 생존율이 낮은 상황입니다
(15 dpf 기준, 약 50마리 중 8마리 내외 생존).

이에 치어 사료를 변경하는 방안을 검토 중이며,
스피룰리나 급여가 치어 생존율 개선에 도움이 될 수 있다는 의견을 접하여
해당 사료의 사용 가능 여부를 문의드리고자 합니다.
스피룰리나를 제브라피쉬 치어에게 급여하는 것이 제브라피쉬 사육 가이드라인 및 수질·생존 측면에서 적절한지, 또는 권장되지 않는 사료인지 확인 부탁드립니다.
아울러, 치어 초기 생존율 개선을 위해 권장하시는 사료 또는 급여 전략이 있다면 함께 안내해주시면 감사하겠습니다.
바쁘시겠지만 검토 후 회신 부탁드립니다.
감사합니다.
답변등록
A
 KHU제브라** 53회 2026-01-16
40
답변완료 제브라피쉬 tg 라인 중에서 Tg(kdrl:EGFP) 는 없을까요? (2)
Q
작성자 KZeb** 작성일 2026-01-06 13:50 조회 37회
안녕하세요, 제브라피쉬 모델 중

1. Tg(fli1a:EGFP)
2. Tg(kdrl:EGFP)

상기 두 가지를 분양받고자 하는데 1번은 보유를 하신 것 같은데 2번은 현재 보유하고 있지 않으신 건지, 요청하면 구할 수 있는 건지 문의드리고자 합니다.
답변등록
A
 KZeb** 37회 2026-01-06
39
답변완료 Zebrafish embryo 상태 (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-12-30 20:08 조회 32회
안녕하세요. zebrafish 발달독성 연구를 진행하기위해 egg를 활용한 연구를 진행하고 있습니다.

요즘 대부분 개체들의 알상태가 조금씩 이상하여 혹시 이러한 현상의 이유를 아시는지 여쭙고자 합니다.

전달드리는 사진과 같이 Chorion 안 cell부분 혹은 yolk 부분 주변에 뽀글뽀글 거리는 기포현상이 보입니다.

혹시 이러한 현상에 대해 아신다면 말씀부탁드립니다.


감사합니다.
답변등록
A
 ** 32회 2025-12-30
38
답변완료 Zebrafish ORO염색 (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-10-26 22:02 조회 61회
안녕하세요.

Zebrafish whole body에서 oil red o staining 하는 방법을 알수 있을까 하여 문의드립니다.

저희가 진행해보았을때, yolk sac 부분에서 staining이 되거나 혹은 swim bladder에만 염색이 되는 경우가 있습니다.

zebrafish larvae 단계에서 liver에서의 ORO 염색을 확인해보고 싶은데 혹시 하는 방법을 알고계신가 하여 문의드립니다.


감사합니다.
답변등록
A
 ** 61회 2025-10-26
37
답변완료 분양받고 나서 안정화 질문입니다. (1)
Q
작성자 이** 작성일 2025-09-24 16:54 조회 53회
AB 분양 잘 받았습니다.
분양후 안정화 프로토콜이 있을까요?
분양후 언제부터 mating을 진행하면 좋을까요?
답변등록
A
 이** 53회 2025-09-24
36
답변완료 분양신고에 대해 질문입니다. (1)
Q
작성자 이** 작성일 2025-09-24 14:41 조회 50회
본 사이트에서 무료 분양 받아 진행중인데
LMO 시설에 신고를 따로 해야할까여?
아니면 어떤 절차를 진행 해야하는지 궁금합니다.
답변등록
A
 이** 50회 2025-09-24
35
답변완료 zebra fish WB 분양분의 (1)
Q
작성자 이** 작성일 2025-09-22 10:46 조회 60회
zebra fish 분양 문의입니다.
WT 을 암수 쌍으로 최대 몇쌍까지 분양 받을 수 있을까요?
답변등록
A
 이** 60회 2025-09-22
34
답변완료 IVF 수행 시, 좋은 난질의 미수정란 확보하기 위한 조건 (1)
Q
작성자 tn** 작성일 2025-09-13 15:39 조회 41회
안녕하세요, 부경대학교 해양수산분자면역학 연구실 입니다.
IVF를 통해 자손 세대를 확보하고자 하여 조건 확보를 위한 예비실험을 진행하고 있습니다.
그런데 KZRC 교육영상 자료에서도 언급되었던 것과 같이 암컷의 난질이 좋지 않다면 인공 수정 성공을 보장할 수 없습니다.
좋은 난질의 미수정란을 확보할 수 있는 개체 사육 조건이 따로 확립된 것이 있을까요?

IVF 방식을 이용하고자 하는 실험의 디자인 상 7일의 휴지기를 각 개체에 부여해야 하기 때문에,
우선 호르몬 자극의 목적으로 암수를 1회 자연교배 한 뒤, 다시 암수분리 하여 하나의 실험 수조에 순치하였습니다. 이때 매쉬망이 부착된 소형의 사각 플라스틱 수조를 실험 수조 내에 설치하여 해당 플라스틱 수조에는 수컷을 수용하고, 큰 실험 수조에는 암컷을 수용하는 방식으로 암수를 구분해 순치하였습니다.
이렇게 7일간 사육하는데, 사육수의 경우 수온은 26-27도씨 사이를 유지하고, pH는 리트머스 종이 기준으로 pH 6-7에 해당했습니다. 급이는 1일 3회 만복급이 하였습니다.
7일 후 해당 암컷 개체를 이용해 IVF에서 진행하는 것과 같이 개체 마취 후 복부 마사지 하여 미수정란을 확보하고자 하였으나 모든 개체의 알이 불투명한 흰색 상태로, 난질 상태가 나쁘다고 판단되었습니다.
혹시 좋은 난질의 미수정란 확보를 위한 방법 혹은 사육 조건이 있다면 알려주실 수 있을까요?
답변등록
A
 tn** 41회 2025-09-13
33
답변완료 Tg list islet:egfp (3)
Q
작성자 ka** 작성일 2025-09-01 16:04 조회 54회
안녕하세요
차의과학대학교 이강한입니다.
Tg 리스트중에 Tg(islet:egfp)라인은 isl2b 유전자 인가요 isl1 유전자 인가요?
현재 DRG neuron에 specific하게 발현하는 Tg를 찾고 있습니다.
감사합니다.
이강한 드림.
답변등록
A
 ka** 54회 2025-09-01
32
답변완료 Albino zebrafish (slc45a2) 분양 여부 문의 (4)
Q
작성자 HJi** 작성일 2025-08-31 15:54 조회 58회
안녕하세요

Albino zebrafish (slc45a2)의 성어 분양 가능 여부를 문의드립니다

홈페이지의 리스트에는 없어서 문의남깁니다

감사합니다

조항찬 드림
답변등록
A
 HJi** 58회 2025-08-31
31
답변완료 microinjection 농도 측정방법 (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-08-29 15:11 조회 52회
안녕하세요.
Embryo에 DNA, MO 등을 미세주입 후 하나의 embryo 당 미세주입된 농도를 측정하고자 합니다.
측정방법과 측정시 필요한 재료들을 알고 싶습니다.
답변등록
A
 ** 52회 2025-08-29
30
답변완료 치어 서바이벌 관련 문의드립니다. (2)
Q
작성자 KHU제브라** 작성일 2025-08-19 20:12 조회 56회
안녕하세요. 경희대학교 제브라피쉬 연구실입니다.
다름이 아니라 치어의 서바이벌이 11dpf에서부터 급격하게 떨어져서 15dpf 이전에 전부 죽거나 1-2마리밖에 생존하지 못하여 이렇게 글을 남깁니다. 11일 이후에 급격하게 죽는 것으로 보아 현재는 베이비 전용 사료 때문이 아닐까 추측하고 있습니다. 사료는 그로비타를 1일 1회 소량 급여 중이고 제조일은 21년도인 제품을 사용중입니다. 따로 유통기한이 나와있지 않아 쓰고 있지만, 혹시 오래된 사료를 사용하는 것이 문제가 생길수도 있는지 궁금하여 이렇게 문의드립니다. (문제가 생기기 전과 후 모두 제조일이 동일한 제품을 사용)

+ 이러한 문제점은 24년도 봄 이후부터 지금까지 지속되고 있습니다. 올해 6월 물고기 병원 측에서 수질검사를 하였을때 암모니아 수치가 높게 나와 매일 drain 해주고 있고 현재는 암모니아 수치가 정상으로 돌아왔습니다.(돌아온지 2달정도 지났습니다.)
1. 수질 의심
생수/물고기용액/1X E3/1XE3 MB 등 다양하게 테스트해보았지만 모두 죽었기 때문에 수질 문제가 아닐 것으로 생각하고 있습니다.
2. 인브리딩 의심
인브리딩이 많이 되어 앰브리오 자체의 상태가 좋지 않을 것이라고 추측했었지만, 외부에서 받아온 물고기끼리 교배를 하여도 모두 15일 이전에 죽었습니다.
3. 어병 의심
물고기 병원에서 검사한 결과 어병은 없는 것으로 나왔습니다.
답변등록
A
 KHU제브라** 56회 2025-08-19
29
답변완료 insulin 모델 (ins:EGFP) 이미징 하는 방법 (2)
Q
작성자 ** 작성일 2025-07-17 19:38 조회 79회
안녕하세요.

insulin 모델인 ins:EGFP Zebrafish 형광이미징을 하는 방법에 대해 문의하고자 합니다.

다른 혈관, 신경 관련 모델에 비해 매우 안쪽 부분에 위치하고 있고 embryo 자체도 두께감이 있기에 선명한 이미징을 얻기 어려움이 있습니다.

혹시 ins:EGPF 모델을 가지고 제대로 이미징을 하는 방법에 대해 아시는게 있으신지 문의하고자 합니다.

DOI: 10.1242/dmm.011346 해당 논문 Figure1A 이미지 처럼 선명하게 detection하는 방법이 있으신지 확인 부탁드립니다.
답변등록
A
 ** 79회 2025-07-17
28
답변완료 Tg fish 배양의 어려움 (1)
Q
작성자 김** 작성일 2025-07-14 19:05 조회 71회
안녕하세요. 거점은행(KZRC)에서 분양해 주신 Tg(vasa:GFP)와 Tg(cyp19a1a:GFP) 두 종의 알~치어단계 생존력이 낮아 배양에 어려움을 겪고 있어 문의드립니다.

Tg(vasa:GFP)의 경우, 13 dpf까지 약 90%의 생존율을 보이는데, 14 dpf=70%, 16 dpf=50%로 급격하게 줄어듭니다.
Tg(cyp19a1a:GFP)는 egg coagulation도 많아 3 dpf에서 70%의 생존율을 보이며, 13 dpf=67%, 14 dpf=60%, 16 dpf=49% 생존율을 보입니다.

조금더 키워 sex differentiation을 할 수 있을 때 transcription을 관찰하는 것이 목표라서 최소한 40일경까지는 80% 수준으로 살릴 수 있으면 제일 좋은데 생존률이 기대보다 매우 낮습니다. 생존률이 급격히 주는 시점을 보면, 아마 먹이를 제대로 먹지 못하는 것이 중요한 이유인 것 같기도 합니다. 하지만 wildtype의 생존률은 높은 편입니다.

현재 연구실의 배양조건은 다음과 같습니다.
1. dechlorinated water로 채운 500 ml 비커에 30-40마리의 밀도로 배양하고 있으며,
2. DO 7.5 이상, pH 7.0-7.8, 수온 25-27도, conductivity 200-230을 유지하고 있습니다.
3. 매일 배양수를 50% 교체하고 있고
4. 먹이는 6 dpf부터 젬마75(아침저녁)를 주고, 11 dpf부터 젬마75(아침저녁)+테트라(간식), 15 dpf부터 알테미아를 급여하고 있습니다.

혹시 배양할 때 주의사항이 더 있는지 궁금합니다.
답변등록
A
 김** 71회 2025-07-14
27
답변완료 돌연변이 표현형 문의드립니다. (1)
Q
작성자 KHU제브라** 작성일 2025-06-27 13:19 조회 57회
안녕하세요.
진행중인 연구에 참고하고 싶어서 그런데,
현재 KZRC 측에서 보유 중인 돌연변이 라인 6dpf 이내에 표현형이 나타나는 라인이 어떤 것이 있나요??
알려주시면 감사하겠습니다!!
답변등록
A
 KHU제브라** 57회 2025-06-27
26
답변완료 mutant line의 genotyping 관련 문의 (3)
Q
작성자 윤** 작성일 2025-06-26 20:03 조회 217회
안녕하세요. 제브라피쉬 mutant line의 genotyping과 관련하여 문의드립니다.

저희 연구실에서는 향후 특정 유전자 mutant line의 도입 및 분석을 고려하고 있으며, 관련하여 genotyping 방법에 대한 사전 정보를 파악하고자 합니다. 예를 들어, 아래와 같은 정보가 주어진 mutant line (예: asic1c)의 경우를 가정해 보았습니다:
Nature of mutation: 7 bp deletion
Mutant 확인 primers (F/R): F: cacttggccgacccggaagtc R: gtactccagcttgccacaaggt
Size of PCR product: 236 bp
Mutant 확인 방법: PCR

이와 같은 경우, genomic DNA를 template으로 하여 위 primer를 사용한 PCR에서 236 bp의 증폭 산물이 관측되면 mutant임을 확인할 수 있다는 의미인지 궁금합니다.

그러나 실제 실험에서는 7 bp 정도의 소규모 deletion은 일반적인 agarose gel electrophoresis 상에서 wild-type과 mutant 간 밴드 사이즈 차이로는 분별이 어려울 수 있어, T7E1 assay, restriction enzyme digestion, 혹은 Sanger sequencing과 같은 추가적인 분석이 필요한 것으로 알고 있습니다.

이에 다음과 같은 사항들을 여쭙고자 합니다:
1. KZRC에서는 위와 같이 소규모 deletion을 가진 mutant line의 genotyping을 어떠한 방법으로 수행하고 계시는지가 궁금합니다.
2. PCR 후 밴드 크기만으로 mutant를 판단하시는지, 아니면 추가적인 분석을 병행하시는지 여쭙고자 합니다.
3. 내부적으로 권장하시는 genotyping 프로토콜이나 분석 기준이 있다면 공유 부탁드립니다.

답변 주시면 연구에 큰 도움이 될 것 같습니다.
감사합니다.
답변등록
A
 윤** 217회 2025-06-26
25
답변완료 Zebrafish larvae(embryos) cryosection 하는 방법 (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-06-25 17:12 조회 186회
안녕하세요. zebrafish larvae(embryo)를 사용하여 발달독성을 연구를 주로 하고 있습니다.

Tg모델로 이미징화 하는것은 주로 하고 있지만 cryosection해서 조직학적인 변화도 확인하고 싶어서 혹시 cryosection하는 방법에 대해 문의드리고자 합니다.

이전에 크기가 작아서 paraffin embedding을 Tissue process기기 사용없이 수동으로 직접해봤지만 하는과정에서 몸이 너무 굽어져서 section을 할수 없었습니다.

따라서 cryosection을 이용하여 확인해보고싶은데 하는 방법에 대해 문의드리고자합니다.


감사합니다.
답변등록
A
 ** 186회 2025-06-25
24
답변완료 microglia specific transgenic zebrafish (2)
Q
작성자 ka** 작성일 2025-06-16 11:56 조회 97회
안녕하세요
차의과대학교 의학전문대학원 이강한입니다.

KZRC에서 현재 microglia 특이적으로 발현하는 TG 라인이 있을까요?

MPEG1:EGFP 라인이 두개가 있던데 두 라인이 다른 것일 까요?
답변등록
A
 ka** 97회 2025-06-16
23
답변완료 Gal4-UAS 시스템을 사용할 때 안정적인 발현을 위한 targeted integration 방법에 대해 … (2)
Q
작성자 윤** 작성일 2025-06-13 15:06 조회 154회
저희 연구실에서는 Gal4-UAS 시스템을 기반으로 한 transgenic zebrafish 라인을 주로 제작하고 있으며, 그 과정에서 UAS promoter를 포함한 유전자를 주입하고 있습니다. 하지만 Gal4-UAS 시스템을 사용할 경우, UAS 유전자가 어디에 integration되었는지에 따라 발현 패턴에 큰 차이가 나타나는 것을 관찰하였습니다. 일반적인 경우, Gal4 없이 다른 프로모터로 stable line을 제작하면 일정한 발현 패턴을 보이는 반면, Gal4-UAS 시스템을 이용한 경우에는 stable line임에도 개체 간 발현 편차가 상대적으로 크다는 점을 반복적으로 관찰하였습니다.

이와 관련하여 해결 방안을 모색하던 중, 최근 발표된 “pIGLET: Safe harbor landing sites for reproducible and efficient transgenesis in zebrafish” (https://www.science.org/doi/10.1126/sciadv.adn6603) 논문을 참고하게 되었습니다. 해당 연구에서는 phiC31 integrase 시스템을 이용하여 safe harbor locus로의 targeted integration을 유도함으로써, 기존의 Tol2 방식처럼 무작위 integration으로 인한 발현 변이를 줄이고, 생존에 치명적인 유전자들을 회피할 수 있다고 설명하고 있습니다.

이에 대해 거점은행에서는 pIGLET 시스템이나 유사한 targeted integration 방법 (CRISPR/Cas9 K/I처럼 낮은 효율을 가진것 제외)을 사용해본 경험이 있으신지를 여쭙고 싶습니다.
정보를 공유해주시면 큰 도움이 될 것 같습니다. 감사합니다.
답변등록
A
 윤** 154회 2025-06-13
22
답변완료 Zebrafish에서 기형 및 감염 의심 증상 관련 질문 + 장기 미브리딩 암컷 문제 해결 문의 (1)
Q
작성자 윤** 작성일 2025-05-13 22:19 조회 113회
안녕하세요. 저희 연구실에서는 다양한 Tg 및 mutant zebrafish 라인을 장기적으로 사육하고 있습니다. 최근 몇 가지 문제가 반복적으로 관찰되어 자문을 구하고자 합니다

[1] 감염성 질환 및 전신 증상 관련 질문
사육 중 일부 개체에서 다음과 같은 증상이 간헐적으로 발생하고 있습니다:
* 배가 심하게 홀쭉해지며 건강이 악화되는 양상
* 복부에 물이 찬 듯한 주머니 형성 (dropsy 유사 증상)
* 입에 껍질처럼 보이는 조직이 매달려 있음
* 안구 돌출, 또는 비늘이 솔방울처럼 솟는 증상
저희가 이런 증상들을 조사해보았을때, 박테리아(예: Mycobacterium, Aeromonas) 또는 기생충(Pseudocapillaria 등) 감염 가능성을 의심하고 있습니다. 혹시 유사한 증상을 경험하셨거나, 효과적인 진단법 및 치료 전략에 대해 조언 주실 수 있을까요?

[2] 성체 암컷의 과도한 배 팽창 및 척추 변형 관련 질문
또한, 성체가 되면 암수 분리 사육을 기본 원칙으로 하고 있는데, 일정 기간 브리딩을 하지 않은 암컷 개체에서 다음과 같은 현상이 관찰됩니다:
* 복부 팽창 심화
* 척추가 휘거나, 제대로 수영하지 못함
해당 증상이 미산란 상태에서의 난소 정체로 인해 발생하는 것으로 추측하고 있습니다. 실제로 이런 문제가 반복되며 개체 컨디션이 급격히 악화되는 사례가 있습니다.
이와 관련하여 다음 두 가지를 여쭙고 싶습니다:
1. 이러한 미브리딩 암컷의 문제를 방지하기 위한 효과적인 방법이 있을까요?
2. 거점은행이나 대형 facility에서도 수백 개 라인을 모두 정기적으로 mating하기 어려울 텐데, 효율적인 개체 관리 방안이나 egg-release 관리법이 있다면 공유 부탁드립니다.

감사합니다.
답변등록
A
 윤** 113회 2025-05-13
21
답변완료 제브라피쉬 성어 분양 받아서 브리딩이 가능할까요? (1)
Q
작성자 송사리** 작성일 2025-05-13 11:44 조회 125회
알 단계부터 노출해서 10 dpf 까지 노출하는 노출 실험을 계획했는데 현재 실험실 사육 시스템에 알을 낳을 수 있는 암수가 없어서 실험을 못하는 중입니다. 기존에는 4cm 이상 제브라피쉬를 사용해서 합사 후 교배하여 수정란을 얻었는데 현재 실험실에 있는 제브라피쉬들은 2.5~3cm 정도의 크기밖에 없습니다. 암 수 제브라피쉬 성어를 분양 받아서 브리딩이 가능 할까요? 그리고 알을 낳을 수 있는 시기가 언제부터인지 알 수 있을까요?(크기가 어느 정도 이상이라거나 사육 기간이라거나 번식을 꼭 해야 하는 상황이라 조언 구합니다...) 감사합니다! 좋은 하루 되세요!
답변등록
A
 송사리** 125회 2025-05-13
20
답변완료 tetra bits 급여 관련 문의 드립니다. (1)
Q
작성자 김** 작성일 2025-04-24 15:44 조회 68회
안녕하세요. 서울대학교 박사과정생 김은혜입니다.
tetra bits에 대해 알려주셔서 감사드립니다 :) 참고하여 급여를 진행하려고 하는데,

급여 주기나 언제부터 급여하시는지 궁금합니다. 알테미아와 별도로 주면 되는 것인지 궁금합니다.

감사합니다.
답변등록
A
 김** 68회 2025-04-24
19
답변완료 물고기 사육 사료 정보 문의드립니다. (1)
Q
작성자 김** 작성일 2025-04-23 15:25 조회 74회
안녕하세요. 서울대학교 박사과정 김은혜입니다.

다름이 아니라, 지난번 화순에 방문했을 때 물고기를 빨리 키우고 싶으면 밥 외의 간식을 준다고 하셨는데.
혹시 그 보충 사료의 정보와 모델명을 알 수 있을까요? 이름이 로티퍼? 였던 것 같기도 합니다..

감사합니다!

김은혜 드림
답변등록
A
 김** 74회 2025-04-23
18
답변완료 제브라피쉬 적혈구에 형광이 발현되는 모델이 있을까요? (1)
Q
작성자 고** 작성일 2025-04-16 16:18 조회 79회
안녕하세요.
제브라피쉬 적혈구에 형광이 발현되는 모델을 찾고 있는데 혹시 관련 모델이 있을까요?
답변등록
A
 고** 79회 2025-04-16
17
답변완료 cyp19a1a 형광 발현 위치 (2)
Q
작성자 김** 작성일 2025-04-09 16:05 조회 58회
안녕하세요. 선생님.
서울대학교 최경호 교수님 연구실 김은혜입니다. 저희가 cyp19a1a 형광 물고기를 분양 받았는데, 현미경으로 관찰해보니
머리에서만 형광이 발현되는 것을 확인했습니다. 혹시 cyp19a1a 물고기에서 이런 경우가 있는지 궁금하고,
아니면 cyp19a1b를 분양해주신 것인지 궁금하여 확인을 부탁드리고 싶습니다.

감사합니다.
답변등록
A
 김** 58회 2025-04-09
16
답변완료 CRISPR/Cas-9 K/O Zebrafish의 Stable Line 확립 및 KZRC 분양 정보 문의 (1)
Q
작성자 윤** 작성일 2025-03-17 21:16 조회 109회
안녕하세요.
CRISPR/Cas-9 K/O zebrafish의 stable line을 확립하는 방법과 분양 관련하여 궁금한 점이 있어 문의드립니다.

1. 생존에 필수적인 유전자의 stable line 확립 방법
CRISPR/Cas-9을 이용하여 특정 유전자를 K/O한 zebrafish의 stable line을 확립하고자 합니다.
하지만 해당 유전자가 생존에 필수적인 경우, 성어(adult)까지 생존이 어려울 가능성이 높습니다.
이러한 경우, stable K/O line을 만들기 위한 적절한 전략에는 어떤 방법이 있을까요?

2. KZRC 분양 K/O Zebrafish의 유전자형
KZRC에서 분양하는 CRISPR/Cas-9 K/O zebrafish는 기본적으로 heterozygous 상태로 제공되나요, 아니면 homozygous 상태로 분양이 이루어지나요?

답변 주시면 연구에 큰 도움이 될 것 같습니다. 감사합니다.
답변등록
A
 윤** 109회 2025-03-17
15
답변완료 인브리딩 문의드립니다. (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-03-13 12:57 조회 66회
안녕하세요.
혹시 제브라피쉬 배양 라인을 유지할때
인브리딩 문제는 어떻게 처리하면 될까요?

감사합니다.
답변등록
A
 ** 66회 2025-03-13
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답변완료 제브라피쉬 치어 관리 및 유전적 다양성 유지에 관한 문의 (1)
Q
작성자 윤** 작성일 2025-03-10 15:41 조회 90회
거점은행 담당자분께,

안녕하세요, 제브라피쉬 치어 관리 및 유전적 다양성 유지와 관련하여 몇 가지 궁금한 점이 있어 문의드립니다.

현재 저희는 zebrafish 치어(5dpf~14dpf)를 비커에서 기르고 있으며, 하루 두 번 먹이 급여 전에 물을 교체하고 있습니다. 그러나 치어 개체 수가 증가하면서 관리에 많은 시간이 소요되고 있습니다. 이를 해결하기 위해 fish system에 치어를 넣어보았지만, 수심이 깊어지면서 물살을 약하게 조절하더라도 치어가 제대로 생존하지 못하는 문제가 발생하고 있습니다. 혹시 치어를 보다 효율적으로 관리할 수 있는 방법이 있을지 조언을 구하고자 합니다.

또한, WT fish 간의 연속적인 브리딩으로 인해 inbreeding이 발생하면서 건강 상태가 저하되는 문제가 관찰되고 있습니다. 저희 연구실에서는 WT fish 개체 수가 많지 않아 genetic pool이 충분히 다양하지 않은 상황입니다. 이러한 환경에서 inbreeding을 방지하고 세대를 지속적으로 유지할 수 있는 최적의 방법이 있을지 조언을 부탁드립니다.

바쁘신 와중에 귀중한 시간을 내어 주셔서 감사합니다. 답변 주시면 연구에 큰 도움이 될 것 같습니다.

감사합니다.
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A
 윤** 90회 2025-03-10
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답변완료 pTol2pA2 destination vector 관련 문의 (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-02-27 16:03 조회 66회
안녕하세요.
현재 tol2 transposase를 이용하여 transgenic zebrafish를 만들기 위해 Multisite Gateway cloning 시스템을 준비하고 있습니다.
이때, tol2 transposase 인식 부위을 갖고 있는 pTol2pA2 destination vector가 필요한데, 혹시 이곳 제브라피쉬 연구자원 거점은행에 해당 plasmid가 존재하나요?
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A
 ** 66회 2025-02-27
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답변완료 Zebrafish 해외 수입 관련 문의 (1)
Q
작성자 ZEBR** 작성일 2025-02-25 09:32 조회 102회
안녕하세요.

Zebrafish를 해외에서 수입하고자 수입신고를 진행하려고 합니다.
수입신고 시에 견적서 내 물량과 실제 수입 물량이 동일해야하고 수입 형태도 기입해야한다고 알고 있습니다.
이와 관련하여 질문드립니다.

1. 이동 중 죽는 개체가 죽어 수량이 변동되는 경우는 괜찮은지
2. 이동 과정 중 hatching이 진행되는 경우에는 수입신고를 어떻게 진행해야하는지

답변 주시면 감사하겠습니다.
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A
 ZEBR** 102회 2025-02-25
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답변완료 제브라피쉬 사육장 보유하고 있는 학교나 연구실 (1)
Q
작성자 a** 작성일 2025-02-06 12:59 조회 154회
안녕하세요
혹시 서울이나 경기권에서 제브라피쉬 사육장을 보유하고 있는 학교나 연구실이 있는지 알 수 있을까요?
현재 제브라피쉬 연구를 진행하고 있는 곳을 찾고 있습니다.
감사합니다.
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A
 a** 154회 2025-02-06
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답변완료 FISH 실험 관련한 시약 구매 (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-02-04 15:25 조회 125회
안녕하세요. 제브라피쉬 연구를 진행하면서 KZRC를 통해 FISH(Fluorescence in situ hybridization)를 배우게 되어 앞으로 제브라피쉬 연구에 있어 많은 도움이 될 것 같습니다.

다만, FISH 실험 과정에서 필수로 필요한 제품인 blocking reagent (Roche, 11096176001) 제품을 국내에서 구매할 수 없어 실험진행에 어려움을 겪고 있습니다.

Sigma 사이트 내에서 국내 판매 못하는 제품이라고 안내되어있고 업체를 통해 Roche 본사에 문의해본 결과 국내 취급 및 수입 발주가 안된다고 하셨습니다.

해당 제품을 구입할 수 있는 방법이 있을지 문의드리고자 글 남깁니다.
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A
 ** 125회 2025-02-04
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답변완료 Zebrafish embryo 사육 배양기 (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-01-10 22:11 조회 126회
안녕하세요.

zebrafish embryo를 배양할 수 있는 인큐베이터가 전용 인큐베이터가 아니여서 온도 조건 및 습도를 맞추는 것이 어려운것 같습니다.


혹시 거점은행에서는 embryo를 키울수있는 배양기를 어떤 기기로 사용하는지 공유 가능할까요?


감사합니다.
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A
 ** 126회 2025-01-10
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답변완료 Zebrafish embryo 상태 (1)
Q
작성자 ** 작성일 2025-01-08 15:40 조회 131회
안녕하세요. zebrafish embryo를 가지고 독성연구를 진행하고 있습니다.

embryo를 가지고 실험을 진행해야하는 상황인데 계속적으로 알상태가 안좋아서 문의드립니다.

원래 기존 mating하는 방식은 mating cage에 물 넣고 암수 구별해서 전날에 분리해놓고 다음날 아침에 mating을 시킵니다.

다만, 겨울에는 아침에 물이 너무 차가워지고 해서 한동안 알을 못낳고 있다가 물의 온도를 유지시켜주고자 제브라피쉬 시스템에 전날 분리 시켜놓고 28도 물이 계속 유지될 수 있도록 하였습니다.

알은 다행이 낳기는 하지만 상태가 안좋아서 다시 시스템말고 기존에 하던 방식으로 밖에 빼놓고 사육물과 RO 시스템 물을 섞어서 진행하고 있는데

알의 상태도 여전히 안좋습니다. 또 다른 문제점은 28도 인큐베이터 안에서 알을 사육하는데 발달이 너무 늦습니다.

혹시 이런경우에 어떻게 해야 알 상태도 좋고 발달도 제대로 될까요?

사육 및 Mating , embryo 상태 꿀팁 알려주세요 ㅠ
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A
 ** 131회 2025-01-08
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답변완료 제브라피쉬 larvae, adults 눈 조직 절편 제작 관련해서 질문드립니다. (1)
Q
작성자 ** 작성일 2024-11-20 16:06 조회 124회
안녕하세요. 제브라피쉬 larvae와 adults의 눈(망막 세포층)을 관찰하기 위해서 조직절편을 제작하고자 합니다.
저희가 사용할 수 있는 방법이 파라핀 블록 제작 후 약 5 um 두께의 절편을 만드는 것이고, 6 dpf의 larvae는 whole body를, adults (약 3 cm)는 eye를 dissection해서 사용하였습니다.
이번에 처음 시도해본 결과, 검체의 위치를 조정하는 것과 (눈에 대해 transverse로 자르기 위함) 적절한 위치까지 절편을 자르는 것 (retina의 cell layer가 다 나오기 위함)에 어려움을 겪고 있습니다.
혹시 관련해서 도움을 받을 수 있는 방법이 있을까싶어서 문의드립니다. 감사합니다.
(첨부한 파일은 저희가 원하는 결과를 포함한 파일입니다.)
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A
 ** 124회 2024-11-20
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답변완료 제브라피쉬 치어가 자꾸 10~11 dpf에 죽는데 사육 노하우 전수해주세요. (1)
Q
작성자 이** 작성일 2024-07-23 19:42 조회 266회
현재 치어는 E3 배지에서 사육중이고 , 사료는 하루 1회 로티퍼를 공급중입니다.
인큐베이터에서 키우는 중이고, 9:00~22:00 명주기 입니다.
사육 초기에는 잘 살아남는데 왜 항상 10 dpf에 폐사하는 건가요?
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A
 이** 266회 2024-07-23
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답변완료 Mutant/TG 배아를 이용한 실험과 관련해서 문의드립니다. (1)
Q
작성자 유송은 작성일 2024-07-08 15:30 조회 142회
안녕하세요. Mutant/TG 배아 관련하여 여쭤보고 싶은 게 있어서 문의드립니다.
저는 현재 나노플라스틱에 노출된 제브라피쉬 자어에서 골격 형성 및 발달(기형이 나타나기도 하는지, 어떤 기형이 주로 나타나는지)과 관련한 실험을 진행하려고 하고 있습니다.
Signaling Reporter Lines의 BMP 자어를 이용해서 해당 정보를 확인하는 것이 가능할까요?(어떤 뼈가 표지되어 나타나는지, 사용한 자어를 가지고 qPCR을 진행해도 결과에 영향이 없는지 알고 싶습니다.)

읽어주셔서 감사합니다. 좋은 하루 되세요!
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A
 유송은 142회 2024-07-08
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답변완료 Zebrafish 사육 환경 관련 질문 드립니다. (1)
Q
작성자 이** 작성일 2024-07-03 17:31 조회 199회
안녕하세요. 저희 실험실에서 키우고 있는 zebrafish가 breeding을 못하고 상태도 점점 안 좋아져 AB strain 새로 분양 받았었습니다.
그런데 새로 분양 받은 zebrafish도 breeding을 해보기 전에 모두 죽어버려 저희 사육 환경에 문제가 있다고 판단하여 어떻게 보완해야 할지 여쭤보고자 합니다.
저희 실험실에서는 지역 원수를 5um, Carbon, 1um filter를 거친 후 시스템에 있는 50um filter와 UV를 추가로 거쳐 순환시키고 있습니다.
온도는 28-30도, pH는 7.0-7.5, nitrate는 50mg/L 이상이 되지 않도록 유지하고 있습니다.
또한 불은 9시에 불을 키고 23시에 불을 끄고 있으며 먹이는 brine shrimp로 하루 2번씩 치어는 3번씩 주고 있습니다.
추가로 확인해야 할 사항이나 구비해야 할 장비에 대해 말씀해 주신다면 앞으로의 실험에 큰 도움이 될 듯 합니다. 감사합니다!
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 이** 199회 2024-07-03
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