안녕하세요, 한국화학융합시험연구원 환경독성센터의 이윤하입니다.

먼저 귀중한 시간을 내어 교육을 진행해주신 최석용 교수님께 깊은 감사의 말씀을 드립니다. 또한, 실습 전반에 걸쳐 세심한 지도를 해주신 이소현 박사님을 비롯한 여러 박사님들께도 진심으로 감사드립니다.

이번 qPCR(Real-Time Quantitative PCR) 교육은 유전자 발현 정량 분석의 기본 원리를 이해하고, 실제로 제브라피시(Zebrafish) 치어를 시료로 사용하여 RNA 추출부터 cDNA 합성, qPCR 분석, 결과 해석까지 전 과정을 직접 수행하는 것을 목표로 진행되었습니다.

이론교육에서는 qPCR의 기본 원리, 반응 구성요소, 형광 검출 방식(SYBR Green / TaqMan), 그리고 Ct 값 기반의 정량 계산법(ΔCt, ΔΔCt) 등을 학습하였으며, 이를 바탕으로 실습 단계에서 실제 데이터를 얻는 전 과정을 경험할 수 있었습니다.

실습에서는 제브라피시 치어를 pooling하여 총 RNA를 추출한 후 cDNA를 합성하였고, target gene을 설정하여 qPCR 증폭 반응을 수행했습니다. 그 결과, Amplification curve에서 일정 주기 이후 형광 신호가 지수적으로 증가하는 양상을 확인할 수 있었으며, Melting curve 분석에서는 단일 피크(single peak)가 형성되어 target gene이 특이적으로 증폭되었음을 확인하였습니다.

특히, RNA 추출 및 cDNA 합성 단계에서 시료 품질이 결과 신뢰도에 직접적으로 영향을 미친다는 점을 실습을 통해 체감할 수 있었으며, 실험 과정별로 교수님과 연구진께서 공유해주신 현장 중심의 실험 노하우가 매우 인상 깊었습니다.

이번 교육을 통해 qPCR의 이론적 이해뿐만 아니라, 실제 분석 과정에서 발생할 수 있는 문제점과 해결 방안까지 배울 수 있었던 뜻깊은 시간이었습니다.
다시 한 번 교육을 준비하고 지도해주신 교수님 및 박사님들께 깊이 감사드립니다.

감사합니다.
한국화학융합시험연구원 환경독성센터
이윤하 드림